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      尺寸的計算，在國際上有兩種不同的計算方法：一種方法是按皿蓋計算，理由是在培養時使用恒溫箱內進行培養，它可以計算恒溫箱的體積可存放多少個培養皿；另一種計算方法是按照培養皿皿底計算，理由是在培養時可按照培養皿的皿底體積計算使用多少培養基。

      使用前經過清潔消毒，培養皿清潔與否對工作影響較大，可影響培養基的酸堿度，若有某些化學藥品的存在，會抑制細菌的生長。新購的培養皿應先用熱水沖洗，再置于質量分數為 1 %或 2 %的鹽酸溶液中浸泡數小時，使游離堿性物質除去，再用蒸餾沖洗 2 次。若要培養細菌，再用高壓蒸氣  (一 般 6. 8 × 105Pa 高壓蒸氣)，120℃ 的溫下30min滅菌，置室溫中干燥，或用干熱滅菌，就是將培養皿置于烘箱內，溫度控制在 120℃左右的情況下維持 2h，即可殺死細菌的胞芽。經過消毒的培養皿才能接種培養使用。

      通常使用固體培養基制成平板培養 (就是平板皿名稱的由來)，平板培養基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養基，用溫水 (無菌)溶化，取下試管的棉花塞，管口子酒精燈火焰上通過，然后微啟滅菌的培養皿蓋，使試管口能深入為宜，傾入培養基后即可蓋密，再輕輕地搖勻傾入的培養基，使之均勻地分布于皿底上凝結，即得平板培養基。由于細菌的繁殖、發育生長是與所供給的培養基 (營養)有直接關系，尤其是作定量檢驗分析，對提供營養物的多少，有決定意義。

      細菌培養時對營養物提供的多少、是否均勻，培養皿皿底是否平整極為重要，如培養皿皿底不平，瓊脂的培養基分布將隨培養皿皿底是否平整而有厚有薄，薄的部分營養供給就不足，這對定量分析有著密切關系，故對定量培養皿皿底要求特別平整的原因所在。但作一般定性 (檢驗細菌、菌落生長、繁殖等)，使用普通即可。